• ing. kıs. restriction fragment length polymorphism. rif-lip olarak okunur. genlerin, belirli bir dizilişi tanıyan enzimlerce* parçalara ayrılması ver farklı boyut ve dizilime sahip parçaların elektrik alalardan farklı miktarda etkilenmesi prensibine dayanan genetik kod inceleme yöntemi. filmlerde falan gördüğümüz beyaz kağıt üzerine siyah bantlardan oluşan dna kodu örnekleri rflp analizi ile yapılır.
  • (bkz: elektroforez)
  • günümüzde kullanılan en ilkel moleküler genetik yöntemlerinden biri olduğunu düşünüyorum.

    restriksiyon endonükleazla kes, sonra da southern'e aban. büyük bir zaman kaybı
    gerçekten çok primitif.
    zaten bu yüzden artık rflp yerine pcr daha çok kullanılıyor
  • restriksiyon parça uzunluk polimorfizmi veya sınırlayıcı enzim parça uzunluk çeşitliliği gibi türkçe çevrileri olan moleküler yöntem. 1980'de amerikalı genetikçi ray white ve arkadaşları tarafından ilk polimorfik rflp işaretcisi* tanımlanmış ve insan genome projesinde kullanılması için öneride bulunmuştur. ingiliz genetikçi alec jeffreys ise rflp yöntemini adli tıpta kullanarak, babalık gibi tartışmalı adli vakaların çözümlenmesinde ne kadar başarılı olduğunu göstermiştir.
  • rflp analizi
    restriksiyon endonükleazlar dna'yı genellikle palindromik dizilerden oluşan spesifik bölgelerden keserler. bu diziyi oluşturan bazlardan biri, bir mutasyonla değişikliğe uğrarsa, restriksiyon enzimi artık bu bölgede dna'yı kesemez. mutasyonlar aynı zamanda yeni restriksiyon bölgeleri de oluşturabilir. sonuç olarak, genetik yapıları farklılık gösteren bireylerden elde edilen dna, farklı uzunlukta restriksiyon parçaları oluşturur. bu, restriksiyon parça uzunluk polimorfizmi veya rflp olarak tanımlanır.
    rflp'yi belirlemek için: öncelikle, ilgilenilen diziyi içeren dna parçası, pcr ile amplifiye edilir. amplifiye edilen parça daha sonra uygun bir restriksiyon enzim ile kesilir. parçalar daha sonra jel elektroforez ile ayrılır ve spesifik bir gen probu kullanılarak belirlenir.
    bu metod aynı zamanda adli bilimlerde de kullanılır. suç bölgesinde bulunan dokudan izole edilen bir dna örneğinin restriksiyon modeli suçlulardan elde edilen dna örneğine uyup uymadığı kontrole dilerek suçlularn saptanmasını sağlayabiliyor. dna içeren materyalin çok az miktarları bile bir "genetik parmak izi" oluşturmak için yeterlidir. rflp analizinin ikinci bir önemli uygulaması, kalıtsal hastalıklara yol açan genetik mutasyonların tanımlanmasıdır.

    kaynak: jan koolman, klaus-heinrich röhm renkli biyokimya atlası
    rflp analizi
  • rflp (restriction fragment lenght polymorphism), 1990'lı yıllarda kullanılmaya başlanılan moleküler yöntemlerden biridir. bu yöntemde, dna restriksiyon enzimleri(kesim enzimi) ile parçalara ayrılarak incelenir. bu yöntemin aşamaları,
    1) dna izolasyonu 2) dna’nın restriksiyon enzimleri ile kesilmesi 3) kesilen dna’ların radyoaktif problarla işaretlenmesi 4)görüntülenmesi
    bu yöntemin dezavantajları, işgücünün fazla olması ve radyoaktif işaretleme gerektiriyor olmasıdır.
hesabın var mı? giriş yap